Fehérje expresszió

Bővebben a PAA weboldalán

Az eukarióta szervezetekben termelődő fehérjék felépítésének, funkciójának, interakciójának tanulmányozásához, a fehérjék poszttranszlációs modifikálásához és a fehérje folding-hoz elengedhetetlen feltétel a megfelelő eukarióta expressziós rendszer használata. Az emlős és élesztő sejtek mellett a rovarsejteket használják erre a célra, mivel ezeket könnyű tenyészteni, magas expressziós szint érhető el és a fehérje modifikációs rendszerrel is rendelkezik.
A transzfer vektorba klónozott vizsgálni kívánt gén homológ rekombinációval helyet cserél a baculovírus DNS állományában lévő nem esszenciális génszakasszal, így a vizsgálni kívánt génszakasz a baculovírusba kerül és alkalmas a vizsgálni kívánt gén expressziójára.
A BaculoOne expressziós rendszer egy eukarióta fehérjék rovarsejtekben történő termeltetésére kifejlesztett baculovírus expressziós rendszer. A vizsgálni kívánt gén egy lépésben homológ rekombinációval egy transzfer vektorból a baculovírus genomjába kerül, ahol magas szinten fejeződik ki.
A PAA BaculoOne expressziós rendszer esetében nincs szükség a rekombináns és nem rekombináns vektorok kiszűrésére és kiválasztására, csak a rekombináns vektorok képesek replikálódni. A PAA BaculoOne HY és LL vírusrendszerek alkalmasak nehezen expresszálható fehérjék termeltetésére is, csökken degradáció és az LL rendszer esetében hosszabb sejt stabilitás és élettartam érhető el.
A PAA négy transzfer vektort kínál a vizsgálandó gén beviteléhez (pAA1-4). A pAA1-2 standard vektorok mellett pAA3 és pAA4 korai expressziót biztosít, ami fontos, ha kifejezett poszttranszlációs módosítást igényel a fehérje.