Transzformáció, transzfekció

Transzformáció

Részletes információk a Kompetens sejtek-nél.

Transzfekció

A kationos lipideket, mint a Lipofectamine 2000 Transfection Reagent-t speciálisan azért fejlesztették ki, hogy megkönnyítsék a DNS és siRNS bejutását a sejtekbe. A kationos lipidek alapstruktúrája egy pozitívan töltött fejcsoportból és egy vagy két szénhidrogén láncból áll. A töltéssel rendelkező fejcsoport irányítja a kölcsönhatást a lipidek és a nukleinsavak foszfát váza között, ami megkönnyíti a DNS kondenzációt. Vízbe kerüléskor a kationos lipidek neutrális lipidekkel, vagy segítő lipidekkel gyakran formálnak kizárás és mikrofluidizálás követően egy unilamelláris liposzomális struktúrát, felszínükön pozitív töltéssel.

A liposzómák pozitív felszíni töltése kölcsönhatást közvetít a nukleinsav és a sejt membrán között, mivel a liposzóma/nukleinsav (transzfekciós komplex) fuzionál a negatív töltésű sejtmembránnal. A transzfekciós komplex endocitózis folyamatával jut be a sejtbe. Endocitózis olyan folyamat, amely során a celluláris membrán egy lokalizált része felveszi a DNS-liposzóma komplexet majd egy intracelluláris vezikulumot formál. Sejten belül a komplex diffúzió segítségével jut a citoplazmába, és onnan belép a sejtmagba.

Transzfekciós reagens	Kulcs tulajdonságok & Reagens alkalmazása
Új! Lipofectamine^TM LTX Transfection Reagent	- Magas transzfekciós hatékonyságot és alacsony toxicitási szintet mutat többféle sejtvonalban - Kiváló transzfekciós eredményeket mutat sok primer és nehezen transzfektálható sejtnél - Optimalizált protokoll áll rendelkezésre már több mint 20 különböző sejtvonalhoz, így kevesebb idő szükséges a kiértékeléshez és az optimalizáláshoz
Új! FreeStyle^TM MAX Transfection Reagent	- Optimalizált tranziens transzfekcióhoz CHO szuszpenziós sejtekben, és szintén működik HEK-293 sejtekben - Széles skálán használják tranziens proteintermeltetésre milligrammnyi protein hozammal
Új! Lipofectamine^TM RNAiMAX Transfection Reagent	- Magas transzfekciós hatékonyság, alacsonyabb RNSi koncentrációt igényel, hatékony gén kiütést eredményez minimális nem specifikus hatással - Könnyű optimalizálni, köszönhetően a minimális citotoxicitásának - Kompatibilis sok sejttípussal, ami a legjobb megközelítést adja a géncsendesítési kísérletekhez
Lipofectamine® 2000 Transfection Reagent	- Legmagasabb hatékonyságot és expressziós eredményeket a plazmid vagy az RNSi transzfekcióknál éri el - Sok fajta sejttípussal tud hatékonyan dolgozni (adherens vagy szuszpenziós) - Könnyű és gyors protokoll, nincs szükség mosásra se transzfekció előtt se után - A komplex hozzáadható a sejtekhez akkor is, ha szérumot tartalmazó médiumban vannak - Ideális, ha a transzfekció 90% vagy annál nagyobb konfluenciánál történik (minimális a citotoxicitás a transzfekciót követően)
Lipofectamine® 2000 CD Transfection Reagent	- Hasonló eredményei vannak, mint Lipofectamine® 2000-nek, nem állati eredetű (CD = kémiailag van létrehozva)
Oligofectamine® Transfection Reagent	- Antisense oligonukleotid transzfekcióhoz
293fectin® Transfection Reagent	- Tranziens protein termelésre használják a FreeStyle® 293 Expression System-rel együtt - Optimalizált a szuszpenziós FreeStyle® 293-F sejtekhez
Cellfectin® Transfection Reagent	- Rovar sejtekhez ideális, például az S2, Sf9, Sf21 és High Five® sejtekhez
DMRIE-C Transfection Reagent	- Suszpenziós sejtekhez, mint például a CHO, limfoid, vagy Jurkat sejtek
Lipofectamine® Transfection Reagent	- Első generációs reagens plazmid DNS transzfekcióhoz - Legtöbbször a Lipofectamine® 2000 jobb eredményeket mutat, mint Lipofectamine® Transfection Reagent
Lipofectin® Transfection Reagent	- Első generációs reagens plazmid DNS transzfekcióhoz - Legtöbbször a Lipofectamine® 2000 jobb eredményeket mutat, mint Lipofectin® Transfection Reagent
Optifect^TM Transfection Reagent	- Széles körben használt reagens, amit alacsony konfluenciához fejlesztettek ki (70% konfluencia ) - Azoknál a sejtvonalaknál hasznos, amelyek érzékenyek a transzfekciós reagensekre